crispr-cas9技术是目前大热的基因编辑技术,它利用短rna(grna)来引导核酸酶(cas9)到达dna靶点。该技术使用简单而且扩展性强,已被广泛应用于实验室研究、生物医学研究、动植物基因工程等领域。包括建立各种遗传修饰的模式生物模型、建立基因调控(如敲除、插入、抑制、激活)细胞系、动植物育种、遗传疾病修复、癌症等重大疾病治疗以及相关药物靶点筛选等。

泓迅科技提供sgrna质粒构建服务,针对不同物种(动物、植物等)提供多种质粒构建方案,可以最大程度的匹配实验所用材料,提高质粒构建的成功率,为您提供快速、优质的sgrna载体构建服务。

crispr-cas9 sgrna载体构建服务优势:

  1. 全模式物种sgrna设计:可完成13种模式动物的sgrna设计服务;
  2. 丰富的质粒结构:可提供多种物种经过验证的质粒结构,满足您的实验需求;
  3. 成功率高:针对不同基因设计多个靶点,提高质粒构建的成功率;
  4. 质粒验证服务:构建质粒的同时,也可提供sgrna活性验证服务,检测sgrna活性,提高实验成功率。

sgrna及cas9质粒构建载体图

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crispr-cas9 sgrna载体构建服务流程

步骤 服务内容
明确物种和载体 不同物种不同载体
设计靶点 一般在不同转录产物的共同外显子上设计3-5个靶点,尽可能破坏重要的domain和所有转录产物isoform。
常用靶点设计网站:http://crispr.mit.edu/
合成 合成前确认检测靶点是否存在snp(如果存在snp,则不能用t7e1酶检测是否存在突变)
靶点切割活性检测 293t细胞内检测ssa活性 酶体外切割活性验证(推荐)
内源活性验证      
(有条件选择)
若目的细胞转染率高,如293t细胞,可转染72h后提基因组,扩增靶序列,t7e1酶切验证,进一步测序验证。

 
sgrna载体构建服务订购与咨询
您可以通过以下任意方式下单或咨询,工作时间保证在1小时内给您反馈:

  1. email:请将您的需求发送到support@synbio-tech.com
  2. 电话咨询:您可以直接拨打免费热线4000-973-630转803联系经验丰富的工程师
  3. qq咨询:任何技术问题均可与在线互动,泓迅科技官方企业qq:4000-973-630